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Ascus种类嗜热

来自Thermoscus aurantiacusvar(Thermoascusaurantiacusvar)。
所述β-葡糖苷酶基因BGLI和BglII,RT上Rebisuporasu RNA的全长序列 - 通过PCR克隆。
Genbank的访问号码分别为欧盟269025和欧盟263993。插入片段插入巴斯德毕赤酵母质粒pPIC9K的巴斯德毕赤酵母分泌表达载体中,以获得重组载体pPIC9K /的BglⅠ和pPIC9K中/ BglII位。在毕赤酵母的酵母GS115株工程应变表达β-通过醇氧化酶AOX1基因启动子的作用而得到有效葡糖苷酶。
通过DEAE-Sepharose阴离子色谱法纯化重组表达的蛋白质。根据SDS-PAGE,所述重组蛋白的分子量约为120千道尔顿和118 kDa的。
修饰菌株的发酵液中β-葡萄糖苷酶的活性为每甲醇1个。
2 U / mg和0。
23 U / mg,小规模发酵量达到0。
45毫克/毫升。
β-葡萄糖苷酶的最佳反应温度为60℃,最佳反应pH为5。

在70℃下保持80%的酶活性30分钟,同时在pH 3下保持高的热稳定性。
0?9
在0的条件下,耐酸碱性很强。
最后的酶β-葡萄糖苷酶的最适pH为5。
如图0所示,最佳反应温度为50℃,热稳定性比前一个差。
格兰特单位:山东农业大学[等级]:硕士[学年]:2009年[分类号]:P78
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